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外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時發現外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統一的鑒定標準，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心，這種操作簡單、省時，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準備工作繁雜，耗時，量少。膜受體的識別是外泌體細胞反應的基礎，它可能活躍受體并隨后導致相關信號通路的活躍。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷、療效評價和預后分析。外泌體圖片

超速離心是外泌體提取較常用的方法也被認為是金標準，主要是根據外泌體的沉降系數、大小和形狀將其分離出來。首先4℃低速離心（300-500g，10min）去除死細胞以及細胞碎片，隨后以較高離心速度(2000xg，10min)去除生物聚合物以及凋亡小體，然后用10000xg,30min離心去除大型囊泡，結尾以超速離心沉淀外泌體。通過懸浮以及重復超速離心去除外泌體沉淀中的非外泌體蛋白。超速離心法具有操作簡單、不易被分離試劑污染、獲得的外泌體數量較多等優點。但是此方法需要昂貴的超高速離心機，每次處理的樣本量較小，費時，電鏡鑒定時還發現外泌體易聚集成塊，且上清中仍能檢測到大型囊泡，純度不高，另外高速離心會損傷外泌體影響下游實驗。江西外泌體芯片外泌體的檢測和提取還遇到一個困難即：對各種外泌體的分類。

外泌體研究可以指導診治肝損傷、酒精或非酒精性脂肪肝等其他肝臟疾病。藥物誘導肝損傷（DILI）大鼠模型中，尿外泌體中的蛋白含量減少，包括CD26、CD81和其他潛在的標志物蛋白。而另一項研究則發現DILI大鼠血清中分離到的外泌體含有更高水平的蛋白，如HSP70、HSP90等。MSCs來源的外泌體可以誘導肝細胞增殖相關基因表達，減弱CCL4誘導的肝損傷。而酒精刺激會促進外泌體的分泌，miRNAs水平也會升高，并促進細胞因子的分泌，喚醒單核細胞的分化。盡管已取得上述成果，我們對外泌體的研究尚不夠深入，外泌體在肝臟生理和病理中的重要作用及其臨床應用仍有待繼續探索。

外泌體（Exosome）介導瘤血管的形成和轉移。外泌體（Exosome）能將自身的細胞因子IL-8和VEGF釋放到細胞外，作用于內皮細胞膜表面受體，導致瘤血管快速形成并較終通過發生EMT過程促進瘤的遷移。瘤細胞來源的外泌體（Exosome）中含有血管生長素、血管內皮生長因子等，這些細胞因子以不同的作用方式促進瘤血管的形成，如VEGF通過喚醒磷酸酯酶C和第二信使的形成，誘導纖維蛋白溶解酶原活化物的表達，使得基底膜降解，從而促進瘤細胞的遷移。選擇的分離方式是利用超速離心的方式分離外泌體，并且可以選用梯度密度離心法得到純度更高的外泌體。

目前，在各種健康與疾病模型中都發現，外泌體通過分子信息傳遞扮演著重要的角色。外泌體還越來越多地被認為是疾病的生物標志物和預后因子，具有重要的臨床診斷和治理意義。除此之外，它們還有潛力被用于臨床，作為基因和藥物遞送的載體。健康人和多種疾病的患者會將含有不同RNA和蛋白質成分的外泌體釋放到體液循環中，因其特殊性，外泌體可以作為生物標志物來對疾病進行檢測。例如，從血液或尿液中分離的外泌體可以用作病癥、心臟病的診斷和預后的指標。PS親和法提取的外泌體，其蛋白特異性檢測可高出10~100倍以上。腦脊液外泌體提取

外泌體的復雜性，為疾病檢測和監測提供了一個多指標的診斷窗口。外泌體圖片

所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體被視為特異性分泌的膜泡，參與細胞間通訊，對外泌體的研究興趣日益增長，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創診斷的開發。外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。研究發現鼠的肥大細胞分泌的exosome可以被人的肥大細胞捕獲，并且其攜帶的mRNA成分可以進入細胞漿中可以被翻譯成蛋白質，不只是mRNA，exosomes所轉移的microRNA同樣具有生物活性，在進入靶細胞后可以靶向調節細胞中mRNA的水平。外泌體圖片

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