河南病理免疫組化怎么選擇

病理醫師日常工作中經常說的一句話應該就是“做個免疫組化吧”；不管是臨床醫師，還是患者，他們問的多的問題則是“為什么要做免疫組化？”病理醫師通過“特殊染色”來進行細胞的識別。這一做法的依據是特定細胞和組織中的成分不同、則化學性質不同，通過染色的方法則可以呈現不同顏色。不過，由于組織固定或儲存等，會造成相應物質的活性降低甚至消失，因而限制了特殊染色方法的應用。隨著免疫學研究的進展，根據抗原與相應抗體間特異性結合的性質，則有了現在免疫組化的方法：不同細胞、不同組織中抗原有一定差異，抗體與被測組織中的特定抗原結合，進而通過一定顯色方法將結合的抗體顯示出來。如有相應顯色，則證實可能有被測抗原；無顯色則可能無被測抗原。當然，這一方法中需注意相應的“例外”，如抗體的非特異性結合、非特異性顯色，則容易造成“假陽性”；或者雖有相關抗原、但所用抗體與該抗原并未結合等，則容易造成“假陰性”。隨著免疫組化的應用經驗的增加，這些問題在常規應用中盡量得以避免，前者如各種顯色方法的優化；后者如抗原修復方法的優化、新型抗體開發及選擇。免疫組化的樣本保存要求是什么？河南病理免疫組化怎么選擇

免疫組化應該選擇石蠟切片還是冰凍切片？ 

（1）要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片，這是***我向一老師請教得出的結論。因為作石蠟切片時要高溫烤片，可能會破壞組織的抗原性，如果組織的抗原性較穩定，則可作石蠟切片；但是要求做石蠟切片的，可作冰凍切片。

（2）冰凍切片的優點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性，做免疫組化時不需抗原修復這一步。缺點是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構，可能會使抗原彌散；切片厚度較石蠟的厚，做的片子沒石蠟的漂亮。當你買一抗時，目錄上都寫著做什么樣的切片，如果它寫著只能做冰凍，就不能做石蠟，如寫著兩者都可，那就都能做。

（3）石蠟切片的優點可以保持組織細胞的形態結構，且容易存放在室溫，而冰凍切片比較麻煩，一定要存在-80度的低溫冰箱中，尤其是用來做原位雜交的的切片，為了防止RNA降解，保存一貫很重要。由于石蠟切片可以切到4微米左右，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去，容易成功，而且得到的顏色/形態都較冰凍切片好。

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免疫組化的應用領域

免疫組化在生物醫學研究和臨床診斷中有著廣泛的應用。在**學中，免疫組化通常被用于**標志物的檢測，幫助確定**的類型、分級和預后。例如，免疫組化通過檢測ER、PR和HER2的表達，可以指導乳腺*的***方案。在神經科學中，免疫組化用于研究神經元的分布和功能。在免疫學中，免疫組化可以用于檢測炎癥細胞和免疫細胞在組織中的分布和水平。此外，免疫組化實驗技術還被廣泛應用于發育生物學、病理學和藥物研發等領域。

免疫組化的抗體選擇

抗體是免疫組化實驗成功的關鍵因素之一。選擇合適的一抗需要考慮其特異性、靈敏度和適用性。特異性是指抗體只與目標蛋白結合，而不與其他蛋白發生交叉反應。靈敏度是指抗體能夠檢測低豐度的目標蛋白。適用性是指抗體適用于免疫組化實驗，而不是其他實驗（如Western blot）。此外，免疫組化實驗中還需要考慮抗體的宿主物種、克隆性和濃度。免疫組化二抗的選擇則需要考慮其與一抗的匹配性，以及是否帶有顯色或熒光標記。 免疫組化常見問題原因分析！

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免疫組化的實驗步驟

免疫組化的實驗步驟通常包括組織固定、切片、抗原修復、封閉、一抗孵育、二抗孵育、顯色和復染等。首先，組織樣本需要經過固定（如福爾馬林固定）以保持其形態結構。然后，將固定后的組織包埋在石蠟中并切成薄片。抗原修復是為了暴露被固定過程掩蓋的抗原表位，常用的方法有熱修復和酶消化。封閉步驟是為了減少非特異性結合，通常使用血清或BSA。一抗孵育是關鍵步驟，一抗與目標蛋白特異性結合。二抗孵育則是通過二抗與一抗結合，并連接顯色系統。，通過顯色和復染使目標蛋白可視化。 河南病理免疫組化怎么選擇