江蘇結果客觀的HE染色檢測

來源: 發布時間:2025-02-09

HE染色全名蘇木精—伊紅染色法,屬于化學染色法,其主要依靠蘇木精染液為堿性,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色;伊紅為酸性染料,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。實驗過程:1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來水洗。2、蘇木素染色:切片入蘇木素染液染3-5min,自來水洗,分化液分化,自來水洗,返藍液返藍,流水沖洗。3、伊紅染色:切片依次入85%、95%的梯度酒精脫水各5min,入伊紅染液中染色5min。4、脫水封片:切片依次放入無水乙醇I5min-無水乙醇II5min-無水乙醇Ⅲ5min-二甲Ⅰ5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性樹膠封片。5、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。結果判讀:細胞核呈藍色,細胞質呈紅色HE染色規范化流程以及注意事項。江蘇結果客觀的HE染色檢測

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HE染色細胞質過染分析及應對原因:(1)伊紅染色液濃度太高,特別是焰紅燃料、四溴四氯熒光素鈉的存在;(2)切片在伊紅染色時間過長;(3)切片在伊紅染色后經乙醇脫水步驟時過的太快,而使乙醇分化伊紅的作用不能產生。對策:適當稀釋伊紅染色液,減少伊紅染色時間,或者使切片在乙醇脫水等步驟時,停留時間相對均勻。同樣,也要檢查切片的厚度是否合適。切片中出現藍黑色沉淀物分析及應對原因:蘇木精染色液中的金屬膜,黏附在玻片上。對策:每天染色前仔細過濾蘇木精染色液,或建議使用半氧化蘇木精染色液,如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產生。陜西性價比高的HE染色分析HE染色是組織學、病理學教學與科研中比較基礎、使用比較普遍的技術方法之一。

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HE染色分化作用:染色后,用某些特定的溶液將組織過多結合的染色劑脫去,這個過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在HE染色中用0.5%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木精的醌型結構,使組織與色素分離而褪色。經蘇木精染色后,必須用0.5%鹽酸乙醇分化,使細胞核過多結合的蘇木精染料和細胞漿吸附的蘇木精染料脫去,在進行伊紅染色,才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。因此,在HE染色中分化是極為關鍵的一步。返藍作用:分化之后,蘇木精在酸性條件下處于紅色離子狀態,呈紅色,在堿性條件下處于藍色離子狀態,呈藍色。組織切片經0.5%鹽酸乙醇分化后呈紅色或粉紅色,故分化之后,立即用水出去組織切片上的酸而終止分化,再用弱堿性水(0.2%氨水)使蘇木精染上的細胞核呈現藍色,這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍,但所需時間較長。

HE染色常見問題:切片染色不均勻,有片狀的弱著**存在答:(1)取材時組織太厚,固定過久,導致深部組織固定不佳,而表淺組織過度固定,而透明、脫水、浸蠟均是如此,這樣在后期染色時就會出現染色不均勻。應該將厚的組織剖開固定。(2)制片過程有問題,切片厚薄不一,或者有刀痕,或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一,一般都是在制片時,刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳(一般比較好角度為5°)(3)脫蠟前未烘烤,脫蠟時間過短或脫蠟液使用過久,導致脫蠟不徹底。(4)染色液過少,著色不均勻;或染色時部分組織干涸而另一部分濕潤,這樣會導致組織吸附染料的能力不一。(5)分化不當。南京英瀚斯,專業的病理染色實驗服務平臺。HE染色的基本原理和結果分析。

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HE 染色是病理的主要常規染色,其命名是因為主要使用的兩種試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y,藉由電荷與吸附性的差異,組織結構對不同染料的結合程度不同,我們可以發現Hematoxylin呈色在細胞核,Eosin Y則表現在細胞質與間質,染色優良的片子可以幫助我們在顯微鏡下看到清晰的細胞型態與變化。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異,而且每個實驗室需要的顏色深淺不一,使用者可以依自己的需求另行調整,以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟HE染色取材、染色以及分析方法介紹。吉林結果客觀的HE染色檢測

骨組織HE染色的操作流程。江蘇結果客觀的HE染色檢測

HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行),可改變組織等電點,促進伊紅與胞漿蛋白質結合,其本身不參與染色的反應。當蘇木素染色效能極高,很短時間就導致核漿共染時,可適當地添加冰醋酸(一般不超過2%),抑制蘇木素染色效能,方便控制染色時間,同時也能提高蘇木素染色的清晰度。現在有商用的HE染色液賣,但是質量參差不齊。如果課題組較大,完全可以自己配制,效果也挺好。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周,即可完全成熟,染色效果好,氧化膜和結晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產生氧化膜和結晶,這也是提示更換蘇木素的標志之一)。江蘇結果客觀的HE染色檢測

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